一株变异SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定

作者：戚扬郑宇舒翠莉姜丽胡燕貌盼勇程云

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2004, (04): 422-424.

• 严重急性呼吸综合征
• 冠状病毒(SARS-CoV)
• N蛋白
• 变异
• 表达 SARS
• SARS-CoV
• N protein
• Variance
• expression

目的 :克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒 (SARS CoV)N蛋白的DNA ,构建原核表达质粒pGEX 2T/N ,并诱导表达。方法 :采用RT PCR方法从病毒培养液中获得N基因片段 ,并克隆入T EASY载体中。经PCR、双酶切鉴定后 ,测序。将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX 2T中 ,表达融合蛋白。用表达产物与抗SARS CoV抗体阳性血清做Westernblot。结果 :N蛋白DNA测序的结果与GenBank比对缺失 2 0个bp。GST N融合蛋白以可溶形式表达。Westernblot检测表明 ,其与抗SARS CoV抗体阳性血清的反应呈阳性。结论 :成功地构建原核表...

• 单位
  解放军第302医院