P-糖蛋白的核酸适配体筛选及应用研究

作者：李玉娟; 梁敏; 武广霞; 孙欣欣; 刘珊; 邓玉林

来源：北京理工大学学报, 2021, 41(11): 1236-1244.

DOI：10.15918/j.tbit1001-0645.2020.192

• P-糖蛋白
• SELEX
• 核酸适配体
• P-糖蛋白外排功能
• 抑制剂

基于SELEX技术筛选P-糖蛋白(permeability glycoprotein, P-gp)的特异性核酸适配体(aptamer, Apt),并用酶联免疫吸附测定(ELISA)法、表面等离子体共振(SPR)法表征了Apt与P-gp的结合能力,采用与P-gp结合能力最强的Apt5在人结直肠腺癌细胞(Caco-2)、人脑微管内皮细胞(hCMEC/D3)两种细胞系上考察了对P-gp外排功能的抑制效果.筛选得到10条长度为81 bp的P-gp核酸适配体,结合能力大小顺序为:Apt5>Apt8>Apt1>Apt4>Apt6>Apt10>Apt7>Apt2>Apt9>Apt3. Apt5使hCMEC/D3及Caco-2细胞内罗丹明123的蓄积量分别增加了40.77%(P<0.01),32.39%(P<0.05),能潜在抑制P-gp的外排功能.本研究首次报道了P-gp的多条核酸适配体,与P-gp有较强的结合能力,并能抑制P-gp的外排功能,有望成为P-gp的潜在新型抑制剂.

• 单位
  北京理工大学; 生命学院