摘要
目的筛选重组猪胰蛋白酶(rPT)冻干保护剂和保存方法,及配制细胞消化液的稳定性及其应用。方法在rPT酶液中添加不同浓度不同种类的冻干保护剂,比较冷冻干燥后的活性保留率,并从赋型性、色泽度、溶解性方面评价冻干保护剂的作用;rPT酶液经过无菌过滤处理,内毒素含量检测合格后,冻干。然后配制成细胞消化液,优化细胞消化液组成,将细胞消化液应用于细胞培养。结果添加3%甘露醇和3%海藻糖的rPT冻干品的酶活性保留率分别为101%和86.5%;用PBS缓冲液配制细胞消化液(含有0.01%EDTA)消化贴壁细胞的综合效果最好,且保存在-20℃时稳定性较好。结论从冻干后酶活性保留率和冻干品外观评价,3%甘露醇可作...
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单位生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学