口蹄疫病毒非结构蛋白3D单克隆抗体的制备及鉴定

作者：田美娜; 李永亮; 卢曾军; 付元芳; 袁明; 刘湘涛; 刘在新

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2009, (07): 625-627.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005113

• 口蹄疫病毒
• 非结构蛋白3D
• 单克隆抗体
• 原核表达

目的:制备并鉴定口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3D的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化的原核表达3D蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Western blot以及间接免疫荧光法对mAbs的特异性等进行鉴定。结果:免疫的BALB/c小鼠经过多次融合筛选,共获得5株抗pET28a-3D的mAb,其亚类鉴定3株为IgG1,2株为IgG2b,初步判定所得5株mAb识别2个不同表位。Western blot显示这些mAbs与重组3D蛋白和FMDVO/China99感染的BHK-21细胞中...

• 单位
  农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所