牛IFN-α基因在食品级乳酸乳球菌中的表达及鉴定

作者：齐琳琳; 张中旺; 潘丽; 张永光

来源：中国兽医科学, 2016, (05): 611-615.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2016.05.014

• 乳酸乳球菌
• 牛
• IFN-α基因
• 表达
• 鉴定 Lactococcus lactis
• bovine
• IFN-α
• expression
• identification

本研究旨在构建能够表达牛α干扰素(IFN-α)基因的重组乳酸乳球菌。根据乳酸乳球菌密码子的偏好性对牛IFN-α的成熟肽编码基因序列进行了优化合成,得到IFN-α基因3′端添加6个组氨酸密码子的重组质粒pUC57-IFN-α,以此重组质粒为模板,通过PCR扩增得到上下游分别带有NcoⅠ和SpeⅠ酶切位点的目的片段,双酶切后与表达载体pNZ8149连接,连接产物转化乳酸乳球菌NZ3900感受态细胞,得到的重组质粒通过PCR扩增、酶切鉴定分析以及测序分析表明,重组表达载体构建成功,将重组菌命名为NZ3900/pNZ8149-IFN-α。对重组菌使用nisin诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析,...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室