监测活细胞中诱导激活的Rac、Cdc42信号转导通路的FRET单分子探针

作者：孙斌; 任道全; 张青岩; 邱义兰; 刘如石; 郭向荣

来源：分子细胞生物学报, 2008, (05): 349-358.

• FRET
• 单分子探针
• Rac1
• Cdc42
• 诱导激活 FRET. Single-molecule probes. Rac1. Cdc42. Induced activation

Rho家族鸟苷三磷酸酶,包括Rac1和Cdc42等,参与调节细胞形态、细胞迁移、转录激活和基因表达等一系列细胞过程。根据FRET(Fluorescent resonance energy transfer)技术原理,构建了包含红色荧光蛋白dsRed1与青色荧光蛋白ECFP的全长cDNA,效应分子Pak1或N-WASP的GTP酶联结区域,信号分子Rac1或Cdc42的全长cDNA的几种单分子探针。转染NIH3T3或Hela细胞,以胰岛素、缓激肽为诱导剂,分别激活Rac1、Cdc42信号转导通路。离体荧光光谱检测表明,在两种转染动物细胞中均产生了FRET现象。不同信号转导通路的FRET效率,在诱导...

• 单位
  生命科学学院; 湖南师范大学