制备并初步评价KGDS靶向活化血小板纳米钆对比剂

作者：郭惠庄; 罗文峰; 余盛龙; 李莉; 陈汉威^*

来源：中国医学影像技术, 2021, 37(03): 360-364.

DOI：10.13929/j.issn.1003-3289.2021.03.010

• 磁共振成像
• 对比剂
• 赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸
• 活化血小板

目的制备赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(KGDS)修饰的去铁铁蛋白靶向活化血小板纳米钆(Gd)对比剂(Gd-Afn-KGDS),并评价其理化性质及作为MR对比剂的能力。方法利用去铁铁蛋白自组装特性,通过调节反应液pH值,将Gd螯合剂装载于去铁铁蛋白空腔内;在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)催化下,将可特异性结合血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体的KGDS多肽耦联到去铁铁蛋白表面,经纯化制备出Gd-Afn-KGDS。采用透射电镜、马尔文粒径分析仪观察纳米颗粒形态、大小及分布;采集T1WI测试纳米对比剂增强效果;以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测Gd-Afn-KGDS的细胞毒性;采用荧光显微镜观察Gd-Afn-KGDS与活化血小板和体外血栓靶向结合的特异性。结果 (1)成功构建了Gd-Afn-KGDS,在透射电镜下呈球形,结构完整,粒径10～15 nm,分布均一。水合纳米颗粒粒径(11.0±1.2)nm,具有超微纳米结构。Gd载药率约为17.07个/去铁铁蛋白。(2)MRI信号强度随Gd-Afn-KGDS溶液浓度增加而增强,对比剂T1弛豫时间随Gd-Afn-KGDS浓度增高而缩短,且与弛豫率存在线性关系。(3)Gd-Afn-KGDS对人脐静脉内皮细胞无细胞毒性。(4)Gd-Afn-KGDS能在体外靶向特异性结合活化血小板及血栓。结论构建成功的Gd-Afn-KGDS呈球形结构,大小适宜,靶向特异性强,生物相容性好,并具备良好的MR对比增强效果,有望成为可用于诊断早期动脉血栓的高效特异性MR对比剂。

• 单位
  广州市番禺区中心医院