siRNA沉默HOTAIR表达对人胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响

作者：郭志钢; 王涵; 王冠; 李妍哲; 田宇; 李朝晖^*

来源：中国实验诊断学, 2018, 22(10): 1830-1833.

• siRNA
• HOTAIR
• 胶质瘤
• 增殖
• 侵袭

目的探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)基因对人胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法首先利用荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测HOTAIR在人胶质瘤细胞A172和正常星形胶质细胞HA1800中的表达。然后合成si-HOTAIR,用Lipofectamine 2000转染至A172细胞,同时设立阴性对照(negative control,NC)和空白对照(Blank),qRT-PCR检测转染效率。分别采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术和Transwell侵袭实验检测下调HOTAIR表达对人胶质瘤细胞A172增殖、周期及侵袭的影响。结果 qRT-PCR结果显示,HOTAIR mRNA在A172和HA1800中的相对表达量分别为1.12±0.08和2.67±0.03(P<0.01)。转染siHOTAIR 24h、48h及72h后,A172细胞中HOTAIR表达水平分别下降(38.27±3.52)%、(70.16±0.57)%和(81.54±0.41)%(P<0.01)。MTT结果显示转染si-HOTAIR 48h和72h后,A172细胞的增殖率分别下降(17.38±0.39)%(P<0.05)和(30.54±1.22)%(P<0.01)。流式细胞术显示下调HOTAIR表达能够阻滞A172细胞从G0/G1期向S期转换。Transwell实验结果显示si-HOTAIR组A172细胞穿膜细胞数为36.1±1.5,显著低于NC组的76.8±2.4(P<0.01),降低HOTAIR表达水平能够降低A172细胞的侵袭能力。结论下调HOTAIR表达能够抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭能力,HOTAIR有望成为胶质瘤基因治疗的潜在靶点。

• 单位
  长春中医药大学附属医院; 吉林大学中日联谊医院