基于iTRAQ技术探究不同毒力猫杯状病毒感染宿主细胞后蛋白表达差异的研究

作者：李帅; 臧铭慧; 周振雷^*

来源：中国预防兽医学报, 2022, 44(12): 1261-1268.

• 猫杯状病毒
• iTRAQ
• 差异表达蛋白

为研究不同毒力猫杯状病毒（FCV）感染宿主细胞后蛋白表达的差异，并分析差异表达蛋白的特征和潜在关键蛋白。本实验将FCV强毒株2280与弱毒株F9分别接种猫肾细胞（F81）24 h后，收获细胞裂解液，利用同位素标记相对和绝对定量技术（iTRAQ）分析不同毒力FCV感染细胞后差异表达的蛋白，并经基因本体论（GO）分析差异表达蛋白的功能，利用京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析差异表达蛋白参与的信号通路及其相互作用。从差异表达蛋白中选取2个蛋白通过western blot验证。结果显示，共筛选出103个核心差异蛋白，其中表达上调蛋白39个，表达下调蛋白64个。GO分析结果显示，核心差异蛋白主要参与细胞凋亡、肿瘤坏死因子应答、活性氧代谢调控等生物过程；KEGG分析结果显示，核心差异蛋白显著富集于NF-κB、IL-17、p53、细胞凋亡等信号通路。Western blot验证IVNS1ABP和EIF4B两个差异表达蛋白的表达变化与iTRAQ结果一致，证明iTRAQ技术结果可靠。上述结果表明，致炎和凋亡相关蛋白表达水平的显著改变与FCV 2280株与F9株毒力差异相关。本实验为进一步探究FCV毒力差异机制及该病毒感染的防制奠定基础。