壮骨方对高糖培养下骨祖细胞成骨分化及VEGF表达的影响

作者：白蕊; 陈文辉; 李双蕾^*; 蒋云霞; 翟琳娜; 王婷; 曾施琪

来源：时珍国医国药, 2023, 34(10): 2368-2372.

• 壮骨方
• 糖尿病性骨质疏松症
• 骨祖细胞
• 血管内皮生长因子
• 成骨分化

目的 通过体外细胞实验，探讨壮骨方对高糖培养下的骨祖细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达、骨祖细胞增殖及成骨分化的影响。方法 采用全骨髓细胞贴壁法分离纯化SD大鼠股骨进行骨祖细胞原代培养，待细胞生长至合适浓度后将细胞随机分为阴性对照组、高糖组、高糖+20%壮骨方组、高糖+40%壮骨方组、20%壮骨方组、40%壮骨方组。干预后采用MTT法检测骨祖细胞增殖水平，使用流式细胞术检测骨祖细胞凋亡水平，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组骨祖细胞血管内皮生长因子的表达水平；将细胞进行成骨诱导及药物干预后，采用碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色检测细胞成骨分化情况，采用免疫荧光法检测细胞Osterix表达水平。结果 与阴性对照组比较，高糖培养下骨祖细胞增殖受到显著抑制(P<0.01)、凋亡率显著增加(P<0.01)、VEGF蛋白及mRNA水平显著降低(P<0.01);与高糖组比较，高糖+20%壮骨方组、高糖+40%壮骨方组骨祖细胞增殖抑制情况明显改善(P<0.05)、凋亡率明显减少(P<0.01)、VEGF蛋白及mRNA水平明显上调(P<0.01)。与诱导组比较，高糖干预后骨祖细胞ALP和茜素红着色减少，Osterix表达水平显著降低(P<0.01);与高糖+诱导组比较，高糖+诱导+20%壮骨方组骨祖细胞ALP和茜素红着色增多，Osterix表达水平显著提高(P<0.01)。结论 壮骨方能促进骨祖细胞增殖、抑制细胞凋亡，并可能通过提高骨祖细胞VEGF水平促进骨祖细胞成骨分化，干预糖尿病性骨质疏松症进程。

• 单位
  广西中医药大学赛恩斯新医药学院; 广西中医药大学; 广西中医药大学第一附属医院