白藜芦醇联合顺铂对肺癌A549/DDP细胞的作用机制研究

作者：陈春苗; 田友清; 丁平; 刘平平; 张国哲; 刘荣; 于广华^*

来源：中药新药与临床药理, 2020, 31(05): 523-529.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2020.05.005

• 白藜芦醇
• 顺铂
• A549/DDP细胞
• 联合用药
• 自噬
• 细胞凋亡
• PI3K/AKT/mTOR信号通路

目的基于PI3K/AKT/mTOR信号通路,以人非小细胞肺癌耐顺铂细胞株A549/DDP为研究对象,探讨白藜芦醇联合顺铂对A549/DDP细胞增殖、凋亡、自噬的影响。方法以CCK-8法检测白藜芦醇、顺铂以及两药联用对A549/DDP细胞增殖的影响,并通过Isobologram分析两药联用的协同作用;将A549/DDP细胞分为空白对照组、白藜芦醇组、顺铂组、白藜芦醇+顺铂组;以Hoechst 33342染色和Annexin V/PI双染实验检测细胞凋亡率;免疫荧光实验检测自噬标志物LC3的表达;Western Blot实验检测各组细胞中凋亡相关蛋白、自噬标志物蛋白、PI3K/AKT/mTOR通路蛋白表达。结果与顺铂组比较,白藜芦醇与顺铂两药联用可以明显降低顺铂对A549/DDP细胞的IC50,Isobologram分析结果也表明二者联用对A549/DDP细胞具有协同抑制作用;与空白对照组、白藜芦醇组、顺铂组3组比较,白藜芦醇和顺铂联用可以明显增加A549/DDP细胞凋亡率(P<0.01),降低抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平(P<0.01),上调凋亡蛋白Bax、Caspase 3表达水平(P<0.01),及增加自噬标志物蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ表达水平(P<0.01),降低p62表达水平(P<0.01);此外Western Bolt实验结果表明两药联用可以明显下调p-PI3K、p-AKT,p-mTOR蛋白表达水平(P<0.01)。结论白藜芦醇与顺铂联用可通过PI3K/AKT/mTOR通路,促进A549/DDP细胞自噬诱导细胞凋亡。

• 单位
  江苏医药职业学院