摘要
目的检测男性不育症患者精浆全基因组微小核糖核酸(miRNAs)表达谱,筛选差异表达的miR-106b,探讨其作为男性不育症分子诊断指标的可行性。方法收集163例男性不育症患者及126例正常生育男性精浆,分别混合;用Solexa测序技术分别检测弱精症、非梗阻性无精症和正常生育男性的混合精浆中692种miRNAs的表达,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对表达异常的miR-106b在单个样本中逐一进行验证。结果 Solexa测序结果显示,19种miRNAs在不育症患者精浆中的表达量与健康男性相比变化>2倍,miR-106b在弱精症和无精症患者中分别上调了6.89倍和2.61倍。qRT-PCR结果表明,弱精症组miR-106b含量[中位数(四分位数)]为719.35(518.49,1 183.39)fmol/L,与正常生育组的291.35(148.83,421.56)fmol/L比较,明显升高(U=91.00,P<0.0l);无精症患者miR-106b的含量则明显降低,为60.07(18.38,292.52))fmol/L(U=195.00,P<0.0l)。ROC曲线分析显示,miR-106b诊断弱精症和无精症的曲线下面积(AUCROC)分别为0.844(95%CI,0.734~0.954)和0.720(95%CI,0.575~0.864);鉴别弱精症和无精症的AUCROC为0.902(95%CI,0.822~0.982)。结论男性不育症患者精浆miR-106b表达水平与正常生育男性存在明显差异,有望成为男性不育症诊断和鉴别诊断的辅助指标。
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