LC-MS/MS法测定大鼠胆汁中15种胆汁酸成分

作者：屈昱晨; 王猛猛; 俞蕴莉^*; 张全英; 周文佳

来源：中国医药工业杂志, 2019, 50(06): 660-667.

DOI：10.16522/j.cnki.cjph.2019.06.013

• 胆汁酸
• 高效液相色谱-串联质谱联用
• 方法学
• 分型检测

建立了同时测定大鼠胆汁中15种胆汁酸组分[游离型胆汁酸胆酸(CA)、鹅去氧胆酸(CDCA)、熊去氧胆酸(UDCA)、去氧胆酸(DCA)、石胆酸(LCA),牛磺胆酸、甘氨胆酸及牛磺胆酸和甘氨胆酸与CDCA、UDCA、DCA和LCA的结合型]的高效液相色谱-串联质谱联用方法。由于胆汁中各胆汁酸浓度较高且内源性成分复杂,因此首先需将胆汁进行稀释,并采用分阶段检测,在提高检测灵敏度的同时,能够减少基质效应对测定的影响。采用XTerra RP18色谱柱进行色谱分离,流动相为10 mmol/L乙酸铵溶液∶乙腈,梯度洗脱;采用电喷雾离子源,于负离子模式下进行两阶段多反应检测。胆汁中15种胆汁酸成分能够在30 min内完成基线分离,最低定量限达到1 ng/ml。批内和批间RSD均<15%,低、中、高浓度质控胆汁样本的基质效应在86.28%～114.38%,提取回收率在85.32%～114.95%。以该方法同时测定正常Wistar大鼠胆汁中的胆汁酸谱,结果显示牛磺酸结合型胆汁酸是胆汁中的主要胆汁酸组分。

• 单位
  苏州大学; 苏州大学附属第二医院