His99Arg突变患者血浆凝血因子Ⅷ活性的稳定性研究

作者：游国岭; 王学锋; 丁秋兰; 秦欢欢; 许冠群; 张利伟; 奚晓东; 王鸿利

来源：中国输血杂志, 2013, (10): 985-990.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2013.10.020

• His99Arg
• FⅧ∶C
• 蛋白稳定性
• DNA突变
• 血友病A Hemophilia A
• coagulation factor Ⅷ

目的探讨His99Arg突变致患者血浆凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性检测结果变化大及一期法和二期法FⅧ活性检测结果不相符的分子发病机制。方法以凝固法检测先证者及家系成员凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT),FⅧ活性(FⅧ∶C)、FⅨ∶C等。基于APTT途径的一期法和基于发色底物法途径的二期法检测FⅧ∶C,测定患者血浆分别在37、25、4、-20及-80℃时的FⅧ∶C,测定56℃时患者血浆FⅧ∶C稳定性(一期法)及FⅧ蛋白的热稳定性(EILSA法);以长链PCR及序列特异PCR检测F8基因内含子22及内含子1倒位,对F8基因所有外显子及其侧翼序列测序;以PyMOL软件分析FⅧ突变蛋白的...

• 单位
  医学基因组学国家重点实验室; 上海交通大学医学院附属瑞金医院