微小RNA-150-3p靶向调控IGF1表达及对胃癌细胞侵袭迁移的影响

作者：杨超文; 丁成明; 桂谱程; 余子建

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(09): 769-773.

• 胃癌
• 微小RNA-150-3p
• 侵袭迁移
• 胰岛素样生长因子1

目的探讨微小RNA-150-3p(miR-150-3p)对胰岛素样生长因子1(IGF1)表达的靶向调控及胃癌细胞侵袭迁移的影响。方法采用荧光定量PCR(QPCR)检测正常胃黏膜细胞GES1和胃癌细胞系(AGS和MGC803)的miR-150-3p水平;脂质体法向MGC803细胞转染miR-150-3p模拟物(过表达组)或抑制物(抑制组)并以转染阴性对照序列的细胞为对照组,采用QPCR检测转染24 h后的miR-150-3p和IGF1水平以评估转染效果,划痕实验和Transwell实验分别检测划痕愈合率和穿膜细胞数目,Western blotting检测IGF1、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)水平,双荧光素酶报告基因实验检测miR-150-3p与IGF1的靶向关系。结果 AGS和MGC803细胞的miR-150-3p水平为3.711±0.726和4.861±0.854,均高于GES1细胞的1.025±0.265(P<0.05)。对照组转染24 h后的miR-150-3p水平为1.045±0.574,过表达组的升高至4.168±0.897,而抑制组的降低为0.247±0.097(P<0.05)。对照组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(54.5±3.2)%和(195.2±12.8)个,过表达组的分别升高至(75.2±4.1)%和(274.6±15.9)个,而抑制组降低至(21.5±2.1)%和(124.7±10.6)个(P<0.05)。与对照组比较,过表达组的p-PI3K和p-Akt水平升高,而抑制组的两蛋白水平降低(P<0.05)。miR-150-3p模拟物可抑制IGF1野生型3’端非翻译区的相对荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型的无影响(P>0.05)。对照组IGF1的mRNA和蛋白水平分别为1.025±0.086和0.458±0.073,而过表达组分别降低至0.341±0.059和0.147±0.081(P<0.05)。结论 miR-150-3p在胃癌细胞中高表达,下调该miRNA水平可抑制迁移侵袭及PI3K/Akt通路激活,可能通过靶向IGF1来发挥促癌作用,该miRNA有望成为胃癌的潜在诊疗靶点。

• 单位
  南华大学附属第一医院