human NF-κB miRNA干扰载体的构建

作者：张春勇; 朱海涛; 谢敏

来源：现代医学, 2012, (04): 393-397.

• 细胞核因子-κB
• 胰腺癌
• 基因
• 聚合酶链反应 NF-κB
• pancreatic cancer
• gene
• polymerase chain reaction

目的:设计并构建针对胰腺癌基因治疗中最关键的靶基因人细胞核因子κB(human NF-κB)的miRNA干扰载体。方法:根据靶基因设计并合成miRNA oligo(引物设计软件),将oligo退火成双链,然后用载体构建试剂盒进行重组克隆,将双链的miRNA oligo插入到miRNA表达载体中,构建miRNA质粒,转化入感受态细胞DH5α,从转化平板分别挑取克隆,用载体通用引物进行菌落PCR筛选,筛选得到的阳性克隆进行测序,以验证重组克隆中插入片段序列是否与设计的oligo序列一致。结果:经过比对,重组克隆中插入片段序列与设计的oligo序列完全一致。结论:成功构建了针对靶基因human NF...

• 单位
  南京医科大学; 江苏省肿瘤医院