钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)2-DE分析蛋白制备方法改进及试用于螺旋手性差异蛋白研究

作者：王景梅; 汪志平; 于金鑫; 刘新颖; 邵斌; 蓝瑾瑾; 马丽芳; 陈子元

来源：海洋与湖沼, 2013, (01): 141-147.

• 钝顶节旋藻
• 蛋白质
• 制备方法
• 双向电泳
• 螺旋手性 Arthrospira platensis
• Protein
• Preparation method
• Two-dimensional gel electrophoresis
• Helical chirality

采用冻融破壁和蛋白质分步提取等技术,对钝顶节旋藻2-DE分析蛋白制备方法作了改进,并试用于螺旋手性差异表达蛋白研究,结果表明:(1)钝顶节旋藻细胞反复冻融5次完全破碎,用Tris-HCl提取液提取3次可提得近87%的水溶性蛋白,再用SDS(十二烷基磺酸钠)提取液可从沉淀中提得水不溶性蛋白;(2)将上述水溶性和水不溶性蛋白分别用TCA/丙酮法纯化后作双向电泳(2-DE)分析,可辨蛋白点分别达500和760多个,而两者间的匹配率仅7%,说明分离度好且质量高;(3)利用此法获得了13个与钝顶节旋藻螺旋手性相关的候选蛋白,其中5个为首次发现,候选蛋白功能涉及光合作用、能量代谢、物质外排和环境适应等;(...

• 单位
  浙江大学