四环素基因表达调控系统调控HSV-tk基因表达的单载体构建

作者：王茜; 杜珍武; 赵虹; 张桂珍

来源：中国老年学杂志, 2009, (07): 819-820.

• 四环素
• 基因表达调控
• 自杀基因

目的构建能够调控自杀基因表达的单载体四环素基因表达调控系统。方法以真核表达载体pcDNA3.1为载体构建骨架,将两个四环素基因表达调控元件(TetO2)克隆到pcDNA3.1载体CMV启动子下游,构建成pcDNA3.1-TetO2载体;将单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)与核糖体进位位点(IRES)相连的基因片段克隆入pcDNA3.1-TetO2载体的多克隆酶切位点,构建成pcDNA3.1-TetO2-HSV-TK-IRES载体;将四环素调控子基因(TR)克隆至pcDNA3.1-TetO2-HSV-TK-IRES载体IRES下游,从而构建成pcDNA3.1-TetO2-HSV-TK-IRES-TR载体。利用酶切与测序鉴定克隆结果。结果载体构建过程的酶切结果以及测序结果表明载体构建正确。结论成功构建了能够调控自杀基因表达的单载体四环素基因表达调控系统,为调控自杀基因体外杀伤肿瘤奠定实验基础。

• 单位
  吉林大学中日联谊医院