钩藤发根的高效诱导和最适培养基的筛选

作者：姜育松; 强玮^*; 马东迪; 左婷婷; 苏畅凤; 代玉玉; 路星星

来源：中药材, 2021, 44(11): 2516-2520.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2021.11.004

• 钩藤
• 发根农杆菌
• 发根
• 钩藤碱
• 培养基优化

目的：建立钩藤发根的高效诱导体系，筛选最适于钩藤发根生长和活性成分积累的培养基。方法：用发根农杆菌C58C1(pRiA4)浸染钩藤无菌的茎、嫩叶和老叶，探究C58C1对不同外植体的发根诱导率；用6种植物培养基(1/2MS、MS、N6、White、B5、WPM)培养钩藤发根，HPLC测定钩藤碱和异钩藤的含量。结果：农杆菌C58C1对3种外植体的诱导率都超过了80%,嫩叶的最高达到了91.8%;PCR检测表明农杆菌中rolB和rolC基因均已整合入钩藤发根的基因组；钩藤发根能合成钩藤碱和异钩藤碱2种活性成分，且钩藤碱占优势；B5培养基最适于钩藤发根的生长和2种生物碱的积累，钩藤碱与异钩藤碱产量最高，100 mL培养基分别可积累0.506 mg和0.160 mg; 1/2MS是次优培养基。结论：该研究建立了钩藤发根的高效诱导体系和最适培养体系，为钩藤活性成分的大量生产和农杆菌介导的发根遗传转化体系研究奠定了技术基础。

• 单位
  生命科学学院; 贵州大学