摘要

本发明公开了一种靶向人CD133的纳米抗体及其制备方法,所述方法包括以下步骤:利用稳定表达CD133的CHO细胞系作为抗原,对天然纳米抗体噬菌体展示库进行筛选,之后使用野生型CHO细胞进行负筛,获得特异性靶向人CD133的纳米抗体,将其与人IgG1Fc融合表达并纯化获得纳米抗体-Fc融合蛋白。本发明还公开了将纳米抗体-Fc融合蛋白与DM1偶联,制备基于CD133纳米抗体的抗体药物偶联物,使用CCK-8试剂盒检测其对CD133~+肿瘤细胞的细胞毒作用。本发明制备的CD133纳米抗体具有良好的抗原结合特异性,对CD133~+肿瘤细胞具有剂量依赖的细胞毒作用。