含绿色荧光蛋白报告基因的TIMP-2真核表达载体的构建及其在人成釉细胞瘤中的表达

作者：黄洪章; 张磊涛; 曾东林; 张彬

来源：中华口腔医学杂志, 2006, 41(12): 713-714.

DOI：10.3760/j.issn:1002-0098.2006.12.003

• 成釉细胞瘤
• 基因表达
• 基质金属蛋白酶

目的构建含有绿色荧光蛋白报告基因(GFP)的TIMP-2真核表达载体PcDNA3·1(+)/GFP-TIMP-2,并探讨其在成釉细胞瘤(AB)中的表达情况。方法应用RT-PCR技术从体外培养的人AB中获得TIMP-2目的基因片段,采用分子克隆技术构建该基因的真核表达载体PcDNA3·1(+)/GFP-TIMP-2,并以脂质体为介导转染至体外培养的人AB细胞。流式细胞仪测定转染效率,倒置相差荧光显微镜观察绿色荧光,RT-PCR检测转染前后TIMP-2mRNA的表达量的改变。结果构建的PcDNA3·1(+)/GFP-TIMP-2经酶切和测序鉴定证明和预期结果一致。PcDNA3·1(+)-TIMP-2转染人AM细胞后TIMP-2mRNA的表达量增加。结论成功构建TIMP-2真核表达载体PcDNA3·1(+)/GFP-TIMP-2并转染至人AB细胞。

• 单位
  中山大学