转录因子SIX2基因对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响

作者：崔静轩; 龚治安; 张文天; 刘凯; 李铁; 邵淑丽; 张伟伟^*

来源：中国应用生理学杂志, 2022, 38(06): 622-627.

• 骨骼肌卫星细胞
• 牛
• SIX2
• 增殖
• 细胞培养

目的:研究SIX2基因对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响。方法:以牛骨骼肌卫星细胞为实验材料，采用实时定量PCR法检测增殖24 h、48 h、72 h时牛骨骼肌卫星细胞中SIX2基因的表达量。通过同源重组构建SIX2基因过表达载体，将SIX2基因过表达质粒和对照组空质粒转染至牛骨骼肌卫星细胞中，每组3个复孔。分别在转染细胞24 h、48 h、72 h时采用MTT法检测细胞活力；转染细胞48 h时，采用流式细胞术检测细胞周期、实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞增殖标志基因的表达。结果:随着牛骨骼肌卫星细胞增殖，SIX2 mRNA表达升高；与对照组相比，SIX2基因过表达质粒组的SIX2 mRNA和蛋白表达量分别升高了18和2.6倍(P<0.01)细胞活力增加(P<0.01),G1细胞比例降低了24.6%,S期和G2期细胞比例分别升高了20.3%、 4.31%(P<0.01),Pax7基因mRNA和蛋白的表达量分别升高了15.84和1.22倍，增殖标志性基因PCNA、CCNB1 mRNA和蛋白的表达量分别升高了4.82、2.23和1.55、1.46倍(P<0.01)。结论:过表达SIX2基因促进牛骨骼肌卫星细胞增殖。

• 单位
  齐齐哈尔大学