慢病毒介导shRNA沉默HDAC1表达对EC109细胞生长特性的影响

作者：刘洋博; 何刚; 章波; 庞学利

来源：第三军医大学学报, 2013, (10): 961-964.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2013.10.026

• HDAC1
• 慢病毒
• 食管癌细胞
• 细胞生长 HDAC1
• lentivirus
• esophageal cancer cell
• cell growth

目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默食管癌细胞株EC109的HDAC1表达并观察其对细胞生长的影响。方法以HDAC1为靶基因,合成寡核苷酸,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-PUR载体连接获得重组慢病毒载体;将其与病毒复制包装质粒共感染293T细胞,收集并浓缩上清液获得重组病毒,测定病毒滴度;病毒颗粒转染EC109细胞,通过荧光显微镜等观察转染效率并经有限稀释法获得单克隆来源的细胞系;定量PCR及Western blot检测HDAC1的表达;并观察EC109细胞的生长特性。结果成功构建干扰HDAC1表达的慢病毒载体pGCSIL-SiHDAC1,并在293...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学