西红花苷抑制NFATc3活性促进与肿瘤成纤维细胞共培养的结直肠癌细胞放射敏感性

作者：如桂牙·阿不力孜; 薛青芳; 加依娜提·热马赞

来源：现代药物与临床, 2023, 38(10): 2381-2388.

• 结直肠癌
• 肿瘤成纤维细胞
• 西红花苷
• 放射敏感性
• 活化T细胞核因子c3

目的 探究西红花苷对与肿瘤成纤维细胞（CAFs）共培养的结直肠癌细胞放射敏感性的影响，并探究分子机制。方法 通过实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）和蛋白质免疫印记（Western blotting）比较人正常结肠上皮细胞NCM460和结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116、LOVO中活化T细胞核因子c3(NFATc3)表达差异。建立CAFs与HCT116细胞共培养体系，西红花苷处理细胞后经不同剂量（0、2、4、6、8 Gy）X射线照射，细胞克隆形成实验分析细胞存活分数（SF）。再将HCT116细胞分为对照组、6 Gy组、CAFs/HCT116+6 Gy组、CAFs/HCT116+西红花苷+6 Gy组，进行对应处理后，MTT法检测各处理组HCT116细胞活性，流式细胞术检测各处理组HCT116细胞凋亡率，Hoechst 33258染色观察各处理组HCT116细胞凋亡形态，qRT-PCR和Western blotting测定各处理组HCT116细胞中NFATc3表达水平。结果 相较于人正常结肠上皮细胞NCM460，人结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116、LOVO中的NFATc3 mRNA和蛋白相对表达量均显著上调（P<0.05）。与HCT116细胞比较，与CAFs共培养的HCT116细胞经辐射后的SF显著增高（P<0.05）；与CAFs共培养的HCT116细胞比较，与CAFs共培养的HCT116细胞经西红花苷处理再进行辐射的SF显著降低（P<0.05）。与6 Gy组比较，CAFs/HCT116+6 Gy组HCT116细胞存活率显著升高（P<0.05），细胞凋亡率显著下降（P<0.05），细胞内染色也较为均匀，未见致密浓染的凋亡状细胞，细胞中NFATc3 m RNA和蛋白相对表达量均显著上调（P<0.05）；而与CAFs/HCT116+6 Gy组比较，CAFs/HCT116+西红花苷+6 Gy组HCT116细胞存活率显著降低（P<0.05），细胞凋亡率显著升高（P<0.05），细胞中有较多致密浓染、碎裂荧光块，同时，细胞中NFATc3 m RNA和蛋白相对表达量显著下调（P<0.05）。结论 西红花苷能够明显提高与CAFs共培养的结直肠癌HCT116细胞的放射敏感性，从而促进细胞发生凋亡，该作用可能与抑制NFATc3有关。

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院