山羊痘病毒温度敏感株基因组DNA复制非必需区的筛选

作者：施程洪; 张强; 吴国华; 颜新敏; 鞠厚斌; 李健; 朱海霞; 朱彩珠; 谢芳; 韩若婵; 才学鹏

来源：中国兽医科学, 2007, (09): 737-741.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2007.09.013

• 山羊痘病毒
• 非必需区
• 基因克隆
• 序列分析
• 转染 goatpox virus
• non-essential region(NER)
• gene cloning
• sequence analysis
• transfection

提取山羊痘病毒温度敏感株基因组DNA,用HindⅢ酶切,随机克隆到pUC18质粒中,限制性内切酶片段电泳分析和序列测定结果表明,克隆到4个不同大小的HindⅢ片段pUA、pUB、pUC和pUD。随后,将它们和羊痘病毒Pellor(AY077835)株进行了同源性比较,发现核苷酸同源性为90.0%~94.5%,氨基酸同源性为83.0%~91.4%。选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点,插入P11P7.5-LacZ报告基因,构建了pUA1、pUB1、pUC1和pUD1共4个重组载体质粒。通过脂质体分别转染山羊痘病毒感染的BHK-21细胞,在X-gal存在条件下经蓝白斑筛选重组病毒,获得1株重组病毒,证...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室