慢病毒介导SOX9基因转染骨髓间充质细胞中的基因表达

作者：白洁玉; 梁大川; 程鹏; 杨自权; 卫小春

来源：中国骨伤, 2013, 26(07): 597-600.

• 骨关节炎
• 细胞介导免疫
• 慢病毒属
• SOX9基因
• 骨髓间充质细胞 Osteoarthritis
• Cell-mediated immunity
• Lentivirus
• SOX9 gene
• Bone mesenchymal stem cells

目的:构建携带小鼠SOX9基因的慢病毒载体,体外转染小鼠骨髓间充质细胞,观察小鼠SOX9基因在小鼠间充质细胞中的表达。方法:从含有小鼠SOX9基因的质粒提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增目的基因。连接目的基因与经Age-Ⅰ酶切线性化的慢病毒载体,转化感受态的大肠杆菌对质粒进行扩增,筛出阳性转化子,经293T细胞包装,收集病毒后,通过基因测序和限制性核酸内切酶酶切的方法对质粒进行鉴定。Lenti-SOX9-EGFP体外转染小鼠骨髓间充质细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染是否成功,并通过流式细胞仪测定转染效率。同时利用RT-PCR和Western Blot检测小鼠SOX9基因的表达。结果:成功构...

• 单位
  山西医科大学第二医院