藜麦麸过氧化物酶分离纯化及酶学特性研究

作者：杨晓月; 李小平; 李晨^*

来源：山西农业科学, 2019, 47(06): 977-997.

• 藜麦麸
• 过氧化物酶
• 分离纯化
• 酶活力

经浸提、硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,从藜麦麸中纯化得到了电泳纯的过氧化物酶(peroxidase,POD),其纯化倍数、比活力和回收率分别为23.78,22 753.09 U/mg和19.36%。经SDS-PAGE鉴定,该酶相对分子质量为57.1 ku。在催化愈创木酚与过氧化氢的反应中,酶的最适温度为60℃,最适pH值为6.0,在40～60℃及pH值4～8范围内具有较好的稳定性。以H2O2为底物,测得该酶的Km值为5.61 mmol/L。尿素、Mg2+和Fe3+对酶有激活作用,当其浓度为50 mmol/L时,酶活力被分别激活至119%,117%,161%;K+,Ca2+对藜麦麸POD无显著影响;甲醇,乙醇,异丙醇,正丁醇,KSCN,SDS,Zn2+,Cu2+,Mn2+对酶有抑制作用,其中,正丁醇和SDS对酶的抑制作用很强,当正丁醇体积分数为20%,SDS浓度为10 mmol/L时,酶的活性完全丧失。

• 单位
  山西大学; 生命科学学院