维氏气单胞菌IscR异源表达调控大肠杆菌氧化应激耐受

作者：孙灵敏; 郑渊哲; 李宏; 李娟娟; 唐燕琼; 马香^*; 刘柱

来源：分子植物育种, 2023, 1-12.

• 维氏气单胞菌
• IscR
• pET28a
• 过氧化氢

以维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)基因组为模板，扩增iscR基因全长，经双酶切后与外源表达质粒pET28a连接，并利用电击转化法转化大肠杆菌BL21感受态细胞，通过阳性克隆子筛选，获得含有重组质粒pET28a-iscR的BL21重组菌株BL21-pET28a-iscR。以该重组菌株为研究对象，通过添加特定浓度的IPTG，诱导重组菌株中IscR蛋白表达，并采用0、0.5、1.0、1.5、2.0 mmol/L 5个H2O2终浓度对BL21-pET28a-iscR和转入空载质粒的对照菌株BL21-pET28a处理30 min，最后通过浓度梯度稀释点板试验，观察经不同H2O2浓度处理后细菌的菌落生长情况。研究结果显示，与对照菌株BL21-pET28a相比，在相同H2O2终浓度处理情况下，重组菌株BL21-pET28a-iscR的生长能力均较强，表明维氏气单胞菌来源的IscR蛋白可以异源表达并发挥功能，从而提高重组大肠杆菌的抗氧化应激能力。初步证明维氏气单胞菌IscR蛋白参与细菌响应氧化应激胁迫的调节，为后续进一步探究IscR蛋白参与病原菌环境适应和毒力等功能，并解析细菌胁迫响应的分子机制提供依据。

• 单位
  生命科学学院; 海南大学