环介导等温扩增法直接检测阳性血培养瓶中大肠埃希菌

作者：任春阳; 田杰

来源：重庆医学, 2015, 44(11): 1514-1518.

• 环介导等温技术
• 检测
• 大肠埃希菌

目的应用环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种快速敏感的直接检测阳性血培养瓶中大肠埃希菌的方法。方法根据美国国立卫生研究院基因序列数据库(GenBank)上大肠埃希菌的lacZ(登录号:M74750)基因序列,设计4条特异引物(2条内引物、2条外引物),对lacZ基因进行扩增,对扩增反应进行优化。分别验证该方法的特异性及敏感性,并与传统培养法进行比较。结果在300份阳性血培养瓶中,采用LAMP法检测到68株大肠埃希菌,所设计引物对大肠埃希菌扩增的特异性及敏感性均较好,与传统培养法比较,灵敏度和特异性均达100%,但传统培养法的检出时间为3d,而LAMP法的检出时间只需1h。结论LAMP检测大肠埃希菌是快速、低成本、特异性强、灵敏度高的方法,适合临床开展。

• 单位
  沈阳市第四人民医院