幽门螺杆菌分泌与重组表达的VacA蛋白的分离纯化及其致细胞空泡效应与凋亡的对比研究

作者：常辉; 左钱飞; 敬海明; 邹全明; 兰春慧; 陈东风

来源：军事医学, 2014, 38(09): 714-744.

• 螺杆菌,幽门
• 细胞空泡毒素
• 蛋白纯化
• 细胞凋亡
• 胃肿瘤

目的分离纯化幽门螺杆菌分泌和重组表达的细胞空泡毒素抗原(VacA)蛋白,并评价其致细胞空泡效应及致细胞凋亡效应。方法分别从幽门螺杆菌ATCC26695菌株培养上清和重组表达VacA蛋白的pQE30-VacAE.coliM15基因工程菌中分离纯化VacA蛋白,经酸化后,以不同终浓度(5,10 ng/ml)分别与人胃腺癌AGS细胞共孵24 h,观察致空泡效应,并通过流式细胞术检测细胞凋亡。结果成功分离纯化出幽门螺杆菌分泌和重组表达的VacA蛋白;幽门螺杆菌分泌的VacA蛋白能显著引起AGS细胞的空泡样改变及凋亡(P<0.01),而重组表达的VacA蛋白致细胞空泡样改变及凋亡不显著(P>0.05)。结论幽门螺杆菌分泌的VacA蛋白有良好的空泡毒性及致凋亡效应,而重组表达的VacA蛋白无致空泡及凋亡效应,幽门螺杆菌分泌的VacA蛋白可用于VacA作用机制的研究。

• 单位
  第三军医大学