摘要
该研究主要探讨了小檗碱对钙盐诱导的瓣膜间质细胞成骨分化的作用及其机制,为钙化性主动脉瓣膜疾病的临床治疗提供新的理论思路。使用Western blot检测3例钙化瓣膜组织和1例正常瓣膜组织相关成骨和纤维化指标的表达情况;分离猪瓣膜间质细胞后,MTT实验检测不同浓度小檗碱对瓣膜间质细胞活力的影响并确定小檗碱的最佳浓度范围;使用钙盐培养基培养瓣膜间质细胞,并加入不同浓度的小檗碱处理,Western blot和q-PCR检测不同浓度小檗碱对瓣膜间质细胞纤维化和成骨相关指标表达情况的影响;ALP染色和茜素红S染色分别检测小檗碱对钙盐诱导的瓣膜间质细胞早期及晚期成骨分化能力的影响;Western blot检测小檗碱对不同时间段ERK1/2磷酸化水平的影响,并加入ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059进行验证。结果显示相关成骨指标和纤维化指标在钙化主动脉瓣膜组织相较于正常组织明显上调;小檗碱可以明显降低钙盐诱导的瓣膜间质细胞相关纤维化和成骨指标的上调,降低ALP活性和钙盐沉积,降低ERK1/2磷酸化水平;并且PD98059处理同样降低了钙盐诱导的瓣膜间质细胞相关纤维化和成骨指标的上调。该研究表明小檗碱可以抑制瓣膜间质细胞向肌成纤维细胞或成骨细胞样细胞分化,其机制可能与抑制ERK1/2信号通路有关。
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