CYP2B1新型自杀基因的真核表达载体的构建和瞬时表达

作者：刘址忠; 蔡晓坤; 林菊生; 任精华; 梁扩寰; 黄文英

来源：中国医师杂志, 2005, (01): 1-4.

• CYP2B1/IFF系统
• 肿瘤
• 基因治疗

目的　构建一种新型的CYP2B1自杀基因表达载体并检测其在肿瘤细胞中的表达。方法　根据genebank中鼠CYP2B1基因的核苷酸序列设计一对引物 ,以pc3 /2B1为模板进行PCR扩增 ,将PCRCYP2B1基因产物定向插入到pcDNA3 0中 ,构建CYP2B1基因表达载体pcDNA3 0 /CYP2B1;通过酶切、PCR及测序鉴定重组体。采用脂质体介导法将pcDNA3 0 /CYP2B1转染三种肿瘤细胞株 ,RT -PCR检测CYP2B1基因在各细胞株中的表达。结果　目的片段均成功插入相应的载体中 ,CMV启动子调控下的CYP2B1基因在不同的肿瘤细胞株中实现了表达。结论　CMV启动子调控的CYP2B1真核基因表达载体是肿瘤基因治疗中一种新型、高效的治疗载体。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院