猪源沙门氏菌聚合酶螺旋反应方法的建立与应用

作者：胡瑞鸿; 从秋实; 李艳飞^*

来源：中国预防兽医学报, 2019, 41(12): 1227-1232.

• 沙门氏菌
• 聚合酶螺旋反应
• 等温扩增技术
• 临床检测

为建立一种快速、高效地检测猪源沙门氏菌的聚合酶螺旋反应(PSR)方法,本研究针对猪源沙门氏菌侵袭蛋白A (invA)基因设计3套特异性扩增引物,通过优化孵育温度、d NTPs和Mg2+浓度、Bst聚合酶浓度和反应时间初步建立了猪源沙门氏菌PSR方法。结果显示:该方法可以特异性扩增2株猪沙门氏菌,而对其它12株病原菌无扩增,特异性较强;以沙门氏菌标准株CMCC 50094为模板,并经一系列的稀释,对PSR、LAMP和qRCR方法的敏感性进行检测和比较,结果显示PSR方法和qPCR方法对菌液的最小检出量均为5×101cfu/mL,敏感性为LAMP方法的10倍,敏感性较高;临床样品检测结果显示,经PSR方法在132份仔猪腹泻样本中共检测出猪源沙门氏菌阳性样品18份,与常规培养方法鉴定结果一致,检出率均为13.64%。本研究建立的PSR法为猪源沙门氏菌的快速检测提供了一种可行方法。

• 单位
  东北农业大学