摘要
目的探讨微小RNA (miR)-30a在后发性白内障(PCO)中对晶状体上皮细胞上皮间质转化(EMT)的作用及调控机制。方法通过实时荧光定量PCR检测43例PCO晶状体上皮组织和18例正常晶状体上皮组织中的miR-30a和EMT标志物E-cadherin、Fibronectin表达水平,并通过Pearson相关系数分析miR-30a与EMT标志物表达水平的相关性。检测过表达miR-30a后对人晶状体上皮细胞株SAR01/04增殖和侵袭能力的影响,以及对EMT相关蛋白的表达调控。利用miRNA靶基因预测软件预测miR-30a的靶基因,并通过荧光素酶报告基因进行靶基因和结合序列验证。在PCO和正常晶状体上皮原代细胞中过表达miR-30a后检测EMT相关蛋白的表达差异。结果 miR-30a和E-cadherin在PCO晶状体上皮细胞中呈低表达水平,而Fibronectin呈高表达水平。miR-30a与E-cadherin呈显著正相关关系(r=0.754,P <0.001),而miR-30a与Fibronectin呈显著负相关关系(r=-0.857,P <0.001)。过表达miR-30a后能够降低人晶状体上皮细胞株SAR01/04的增殖和侵袭活力、上调E-cadherin表达、下调Fibronectin、Cox-2和Slug的表达。报告基因分析显示miR-30a能够通过结合到Slug基因的3’-UTR序列而下调Slug的表达。在PCO和正常晶状体上皮原代细胞中过表达miR-30a能上调E-cadherin表达、下调Fibronectin、Slug和Cox-2的表达。结论 miR-30a通过调控Slug的表达来抑制人晶状体上皮细胞的EMT发生而减弱增殖和侵袭。
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