摘要

目的 研究WBSCR22是否参与调控细胞铁死亡。方法 设计合成靶向人WBSCR22基因的siRNA (siWBSCR22),瞬时转染敲低WBSCR22 mRNA;RT-qPCR、Western blotting分别检测WBSCR22 mRNA、蛋白表达水平;铁死亡诱导剂Erastin、RSL3单独或联合抗氧化剂NAC、坏死抑制剂NSA、凋亡抑制剂ZVAD-FMK、自噬抑制剂3-MA作用于人结直肠癌细胞系HCT116和RKO、人肺癌细胞系H460、人肝癌细胞系SMMC7721,CCK8法检测细胞死亡率;丙二醛法、菲罗嗪法分别检测细胞脂质过氧化水平、Fe2+浓度。结果 siWBSCR22瞬时转染显著降低WBSCR22 mRNA及蛋白水平;WBSCR22敲低显著促进Erastin、RSL3诱导的HCT116、RKO、H460、SMMC7721细胞铁死亡;加入NAC后显著降低Erastin、RSL3诱导的WBSCR22敲低细胞铁死亡,而加入NSA、ZVAD-FMK、3-MA对Erastin、RSL3诱导的WBSCR22敲低细胞铁死亡无影响;Erastin、RSL3诱导后细胞内的Fe2+浓度无明显变化,脂质过氧化水平显著增加。结论 WBSCR22基因参与调控肿瘤细胞铁死亡。

  • 单位
    生物工程学院; 杭州医学院

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