人肠三叶因子毕赤酵母表达载体的构建与鉴定

作者：刘伟; 钟雪梅; 许春娣; 陈舜年

来源：中国生化药物杂志, 2006, 27(02): 83-85.

DOI：10.3969/j.issn.1005-1678.2006.02.006

• 人肠三叶因子
• 基因重组
• 毕赤酵母
• 表达载体
• 质粒构建 human intestinal trefoil factor
• genetic recombination
• Pichia pastoris
• expression vector
• construction of plasmid

目的构建人肠三叶因子(hITF)的毕赤酵母表达载体。方法从人结肠黏膜提取总RNA,经RT-PCR得到hITF cDNA,用PCR方法扩增hITF基因,并将其克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中,构建含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的重组表达质粒pPIC9/hITF。结果通过酶切和基因序列分析确定插入pPIC9中的片段为hITF基因片段。结论重组质粒pPIC9/hITF的成功构建,为在真核细胞中高效表达hITF。并制备其抗体的进一步研究提供基础。

• 单位
  上海交通大学医学院附属瑞金医院