黄芪甲苷基于PI3K/Akt/Bcl-2信号通路对PC12细胞OGD/R损伤的保护机制研究

作者：张佳琳; 李元元; 杨文亮; 刘富甲; 田子夏; 谢欣梅; 庞晓斌

来源：神经药理学报, 2017, (05): 1-8.

• 黄芪甲苷
• PC12
• OGD/R
• PI3K/Akt/Bcl-2信号通路
• 神经保护

目的:探究黄芪甲苷（astragaloside IV,AS-IV）对大鼠嗜铬细胞瘤（pheochromocytoma 12,PC12）细胞缺氧缺糖复供（oxygen deprivation reoxygenation,OGD/R）损伤的保护作用及基于磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,又称Akt）及B细胞淋巴瘤-2蛋白（B-cell lymphoma-2,Bcl-2） PI3K/Akt/Bcl-2信号通路的机制研究。方法:体外培养PC12细胞,细胞随机分为空白对照组、模型组（OGD/R）,尼莫地平阳性对照组(5μmol·L-1)和黄芪甲苷组(1.00、0.10、0.01μmol·L-1),除空白组外其余各组均建立体外PC12细胞OGD/R模型。CCK-8试剂盒法检测PC12细胞存活率;乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）试剂盒法测定乳酸脱氢酶的漏出量;采用Hoechst33342和碘化丙啶（propidiumiodide,PI）双染法检测各组细胞凋亡与坏死情况;Western blot检测各组细胞Akt、p-Akt、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2associatedXprotein,Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3 （cysteinylaspartatespecificproteinase-3,Caspase-3）的蛋白表达情况。结果:黄芪甲苷提高PC12细胞OGD/R损伤的细胞存活率,降低LDH漏出量和细胞凋亡。黄芪甲苷浓度依赖性上调p-Akt/Akt、Bcl-2的蛋白表达和下调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达。PI3K/Akt通路的抑制剂LY2940002能抑制黄芪甲苷对OGD/R损伤的PC12细胞中凋亡相关蛋白的影响。结论:黄芪甲苷对OGD/R损伤的PC12细胞具有保护作用,且其保护作用机制可能与PI3K/Akt/Bcl-2信号通路有关。

• 单位
  河南大学; 河南应用技术职业学院; 药物研究所