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摘要
目的 探讨JAG1对单核-巨噬细胞在三阴性乳腺癌（TNBC）中肿瘤转移前微环境（PMN）中作用的影响及其可能的调控机制，以期为TNBC诊疗提供新的思路和靶点。方法 人TNBC细胞MDA-MB-231,MDA-MB-231B体外培养，qRT-PCR检测JAG1的表达。动物实验将雌性裸鼠分为MDA-MB-231组和MDA-MB-231B组，5只/组，分别往乳腺脂肪垫注射细胞5×106,6周取肿瘤组织进行免疫组化分析。人源单核细胞THP-1为研究对象，分别经人源JAG1重组蛋白（rhJAG1）直接处理或经TNBC条件培养基（CM）处理，通过单核-内皮粘附、Transwell、qRT-PCR和Western blot实验检测JAG1对单核细胞的直接作用和在PMN中的影响。实验分为5组：Control组：THP-1正常培养；231-CM组：THP-1+231-CM;231-JAG1-CM组：THP-1+rhJAG1处理后231-CM;231B-CM组：THP-1+231B-CM;231-DAPT-CM组：THP-1+DAPT处理后231-CM。透射电镜（TEM）、纳米颗粒跟踪分析（NTA）检测JAG1对TNBC外泌体分泌影响。生物信息学筛选与LncRNA MALAT1相互作用的miRNA并行qRT-PCR验证。结果 与MDA-MB-231相比，侵袭株MDA-MB-231B的JAG1表达更高（P<0.01），肝转移面积更大；rhJAG1直接处理和TNBC条件培养基处理均能促进单核细胞的黏附、迁移，并影响其分化（均P<0.05）；透射电镜和NTA检测显示JAG1能促进MDA-MB-231外泌体分泌数量增多（P<0.01），外泌体中LncRNA MALAT1含量升高（P<0.0001）。生物信息学分析得到与LncRNA MALAT1和JAG1相关的5个候选miRNA，实验证实miR-26a-5p在TMN中的单核-巨噬细胞中受到MALAT1的靶向调控（P<0.0001）。结论 JAG1能促进TNBC的外泌体分泌并影响其中Lnc MALAT1的表达，从而靶向PMN中单核-巨噬细胞miR-26a-5p的表达，从而使单核-巨噬细胞中JAG1表达升高，进而影响单核-巨噬细胞在PMN中的黏附、迁移和破骨分化作用。
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