儿童急性白血病WT1基因表达的临床意义

作者：胡文婷; 罗长缨; 汤静燕

来源：临床儿科杂志, 2008, (08): 655-659.

• WT1基因
• 质粒
• 实时定量聚合酶链反应
• 急性白血病
• 儿童 WT1 gene
• plasmid
• real-time quantitative PCR
• acute leukemia
• childhood

目的构建WT1质粒,建立实定量聚合酶链反应(RQ-PCR)监测儿童白血病骨髓样本WT1基因的实验方法,初步研究WT1基因在儿童白血病中的表达特点及临床意义。方法设计合成WT1基因引物探针,利用分子克隆方法构建含有目的基因WT1片段的质粒,并以此作为阳性对照检测儿童白血病骨髓样本。通过Taqman荧光探针RQ-PCR方法分别对WT1目的基因及GAPDH内参基因进行检测,利用双标准曲线法对WT1基因的表达水平进行绝对定量,检测结果用WT1与GAPDH基因拷贝数比值(WT1/104·GAPDH)表示。实验结果应用SPSS13.0软件进行统计学处理。结果经酶切电泳和测序分析证实构建的质粒中成功插入了W...

• 单位
  上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心