人脐带间充质干细胞来源工程化纳米囊泡的制备与鉴定

作者：李磊; 杜飞跃; 杨文杰

来源：生物化工, 2023, 9(05): 143-146+151.

DOI：10.3969/j.issn.2096-0387.2023.05.030

• 人脐带间充质干细胞
• 外泌体
• 纳米囊泡
• 制备与鉴定

目的：探索来源于人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）的工程化纳米囊泡（Nanovesicle,NVs）的制备与鉴定方法，为深入了解工程化NVs的生物学功能提供数据基础。方法：采用物理方式破碎hUC-MSCs以获取NVs，并采用改良的超速离心法进行分离和纯化；通过纳米颗粒跟踪分析（NTA）、透射电镜（TEM）观察、蛋白质免疫印迹（WB）及生物学活性分析方法鉴定NVs的特性。结果：建立的方法成功分离出NVs,TEM下观察到NVs呈中间凹陷的茶杯样结构；NTA结果显示NVs直径在100 nm左右；Western Blot实验证实NVs几乎不表达外泌体特异性蛋白TSG101；生物学活性实验表明NVs不能促进人皮肤成纤维（HSF）细胞增殖。结论：本研究建立的hUC-MSCs来源的NVs提取及鉴定方法可行，为NVs在未来的临床研究提供了数据基础。