大鼠促红细胞生成素重组腺病毒载体的构建及其在大鼠SGNs中的表达

作者：钟诚; 姜振东; 张学渊

来源：第三军医大学学报, 2012, (18): 1818-1821.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2012.18.010

• 促红细胞生成素
• 腺病毒
• 构建 erythropoietin
• adenovirus
• construction

目的构建大鼠促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)重组腺病毒载体,并转染于体外培养的大鼠螺旋神经元(spiral ganglion neurons,SGNs)。方法全基因合成大鼠EPO基因,亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-EPO。经酶切、PCR及测序鉴定,再经PacⅠ酶切线性化后电转化感受态细胞,获得重组腺病毒载体pAdTrack-CMV-EPO,经PacⅠ酶切后转染至293细胞进行包装,制备重组腺病毒,扩增后进行病毒滴度测定及RT-PCR和Western blot鉴定。并转染至体外培养的螺旋神经元,免疫荧光检测及蛋白水平检测...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学