沉默肝细胞生长因子受体c－Met表达对结肠癌细胞生物学特性的影响

作者：马德健; 曹珍; 王贲士; 孙燕来^*

来源：中华肿瘤杂志, 2020, 42(05).

• 结直肠肿瘤
• 肝细胞生长因子受体
• 信号通路
• 生物学特性

目的探讨沉默肝细胞生长因子受体c-Met表达对结肠癌细胞生物学特性的影响。方法利用HCT116结肠癌细胞, 通过RNA干扰技术建立c-Met瞬时转染的细胞模型, 同时设阴性对照(siRNA-NC)和空白对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测细胞中c-Met的表达, 通过细胞增殖实验、细胞周期和凋亡测定、细胞侵袭实验、细胞迁移实验等观察沉默c-Met对HCT116结肠癌细胞生物学特性的影响。结果 siRNA-Met组、siRNA-NC组和空白对照组细胞c-Met mRNA的表达水平分别为0.32±0.26、1.05±0.23和1.01±0.03, c-Met蛋白的表达水平分别为0.24±0.03、1.18±0.11和1.23±0.06, siRNA-Met组均显著降低(均P<0.05)。转染后72 h, siRNA-Met组的吸光度值为1.13±0.05, 低于siRNA-NC组(1.53±0.07, P<0.01)和空白对照组(1.48±0.08, P<0.01)。siRNA-Met组G2/M期细胞比例为(14.65±1.41)%, 高于siRNA-NC组[(5.63±0.71)%, P<0.05]和空白对照组[(5.07±0.70)%, P<0.05], 并且siRNA-Met转染后, 细胞周期调节蛋白Cdc25c和cyclin B1的表达水平显著下降。siRNA-Met组细胞凋亡率为(5.85±0.35)%, 显著高于siRNA-NC组[(0.91±1.14)%, P<0.05]和空白对照组[(1.00±0.17)%, P<0.05], 并且siRNA-Met转染后, 凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平显著下降, Bcl-2关联X蛋白(BAX)表达水平显著升高。siRNA-Met组的细胞迁移率为(51.33±8.62)% , 显著低于siRNA-NC组[(102.33±6.43)%,P<0.05]和空白对照组[(100.00±3.72)%, P<0.05]。siRNA-Met组穿透至基底膜下室面的细胞数为(47.50±10.60)个, 少于siRNA-NC组[(102.50±10.61)个, P<0.05]和空白对照组[(100.00±5.33)个, P<0.05], 并且siRNA-Met转染后, 侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达水平显著下降。结论 c-Met在维持结肠癌细胞生物学特性中发挥重要作用, c-Met抑制剂可能在结肠癌治疗中具有重要价值。

• 单位
  山东省肿瘤防治研究院; 山东省医学科学院; 山东省肿瘤医院; 济南大学; 山东第一医科大学