共同抑制mTORC2和热休克蛋白90对多发性骨髓瘤细胞凋亡的影响

作者：傅云峰; 张亚男; 张帆; 刘竞; 桂嵘

来源：中华血液学杂志, 2015, 36(09): 780-784.

• 雷帕霉素
• 多发性骨髓瘤
• 细胞凋亡
• mTORC2信号通路
• HSP90热休克蛋白质类抑制剂

目的探讨共同抑制mTORC2信号通路和热休克蛋白90对多发性骨髓瘤(MM)细胞AKT蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法采用雷帕霉素(20 nmol、L)、17-烯丙胺-17-脱甲氧格尔德霉素(17-AAG)(600nmol/L,)分别及两药联合处理MM细胞株U266、KM3细胞0、8、24、48h,MTT法检测其对细胞增殖的影响;流式细胞术检测其对细胞凋亡及细胞周期的影响;Western blot法检测其对p-AKT(ser473)、p-AKT(thr450)、p-S6(S235/236)及AKT蛋白表达的影响。结果与空白对照组比较,雷帕霉素、17-AAG分别及两药联合后均可抑制UJ266、KM3细胞增殖,尤以联用后抑制作用最为明显(P值均<0.05);均可使细胞周期阻滞在G1期,尤其在作用48 h时周期阻滞最明显(P值均<0.01);处理48 h后空白对照组、雷帕霉素组、17-AAG组、两药联用组KM3细胞的凋亡率分别为(12.21±0.89)%、(18.88±1.83)%、(21.04±0.60)%、(60.07±2.13)%,U266细胞的凋亡率分别为(8.72±0.15)%、(16.45±0.65)%、(17.14±0.59)%、(54.25±1.76)%,与空白对照组比较差异均有统计学意义,两药联用组促凋亡作用更为明显(P值均<0.01)。雷帕霉素作用48 h后可抑制mTORC2信号通路;单用雷帕霉素或17-AAG时可降低AKT蛋白的表达,两药联用作用更为明显(P值均<0.01)。结论共同抑制mTORC2和HSP90活性可降低.AKT蛋白的表达,在体外可明显促进MM细胞株U266、KM3细胞的凋亡。

• 单位
  中南大学湘雅三医院