三氧化二砷对维甲酸耐药的神经母细胞瘤细胞SK-N-AS中HoxC9表达的影响

作者：邬萍萍; 冯楚础; 熊稀霖; 李春谋; 彭晓敏; 王智轩; 黎阳

来源：中国小儿血液与肿瘤杂志, 2022, 27(01): 12-17.

• 神经母细胞瘤
• 三氧化二砷
• 维甲酸耐药
• HoxC9

目的 本研究通过检测三氧化二砷(ATO)处理前后维甲酸(RA)耐药的SK-N-AS细胞中HoxC9以及EZH2的表达，初步探寻ATO促进RA耐药的NB细胞分化的具体机制。方法 用CCK-8试剂盒测定ATO对NB细胞SK-N-AS增殖抑制率，倒置相差显微镜下观察细胞生长情况，并测量神经突触总长度值。利用质谱技术和非标定量蛋白组学方法检测ATO处理后SK-N-AS细胞蛋白信号丰度变化，并对与NB细胞分化相关蛋白进行差异化分析。Western Blot检测HoxC9、HoxD8及EZH2蛋白的表达情况。结果 (1)ATO对SK-N-AS细胞的杀伤作用在4～128μM范围内呈浓度依赖性，ATO对SK-N-AS细胞的半抑制浓度IC50=95.36μM。(2)16μM的ATO处理SK-N-AS细胞24h后，神经突触总长度值升高，与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)16μM ATO处理24h后，SK-N-AS细胞内共鉴定到6424个表达蛋白，其中与分化相关的蛋白，上调的包括正常神经元分化标记物MAPT、NEFM等；下调的包括神经母细胞成瘤性标记物PHOX2B。(4)Western Blot结果表明，16μM ATO处理SK-N-AS细胞24h后，HoxC9、HoxD8蛋白的表达水平上调，EZH2蛋白表达水平下调。结论 (1)ATO可诱导SK-N-AS细胞的神经突触增多，上调SK-N-AS细胞中神经元正常分化相关的标记物HoxC9及HoxD8的表达，下调神经母细胞成瘤性标记物PHOX2B及EZH2。(2)ATO可能通过下调EZH2重新激活HoxC9的表达。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院