摘要
目的明确激活素A(ACT A)对成人脐静脉内皮细胞转分化的影响及卵泡抑素(FS)的干预作用。方法体外培养成人脐静脉内皮细胞(HUVEC),MTT法检测不同浓度rh-ACT A、rh-FS刺激内皮细胞后的增殖率变化。将细胞分为5组:对照组、TGF-β组(T组)、ACT A组(A组)、TGF-β+FS组(T+F组)、ACT A+FS组(A+F组),采用细胞化学染色和Western Blot蛋白印迹技术观察ACT A和TGF-β对HUVEC细胞α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)和VE-钙黏蛋白(VE-cad)表达的影响以及FS的干预作用。结果与0 ng/mL ACT A组相比,10、30、60、100 ng/mL ACT A组的增殖活性均增加(F=22.768,P <0.001),其中30 ng/mL ACT A组的增殖率最高,单独给予FS对细胞增生无明显影响(F=0.437,P=0.781),但FS能拮抗ACT A对内皮细胞生长的促进作用,呈剂量依赖性(F=15.270,P <0.001)。细胞化学染色和Western Blot蛋白印迹结果显示:ACT A组与对照组相比,α-SMA和FN的表达增加,而VE-Cad的表达减少(均P <0.05),与TGF-β组相比,α-SMA、FN和VE-Cad的表达差异无统计学意义(均P> 0.05);FS可阻断ACT A的上述效应(P <0.05),而对TGF-β的作用无明显影响(P> 0.05)。ACT A+FS组与ACT A组相比,α-SMA和FN的表达减少,同时VE-Cad的表达增加(均P <0.05)。TGF-β+FS组与TGF-β组比较,α-SMA、FN和VE-Cad的表达差异无统计学意义(均P> 0.05)。结论 ACT A可诱导内皮细胞转分化及FN的合成,FS可通过阻断ACT A的上述效应,产生内皮细胞保护作用。
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单位山西医科大学; 山西省人民医院