奶牛α-干扰素克隆表达和生物学活性分析

作者：刘颖; 刘华兰; 杨利国; 陈焕春; 郭爱珍

来源：中国兽医学报, 2010, (11): 1495-1499.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.11.006

• 奶牛
• α-干扰素
• 融合蛋白
• 抗病毒活性 bovine
• interferon-alpha
• fusion protein
• antiviral activity

提取经植物血凝素诱导培养的我国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛α-干扰素(BoIFN-α)成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上,测序结果表明,扩增片段为牛α-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到原核表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达,表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在。用镍亲和层析法对蛋白进行纯化,并利用VSV-MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性。重组奶牛α-干扰素对VSV的抗病毒活性为4.26×105U/mL,对IBRV的抗病毒活性为8.91×104U/mL。结果...

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室; 动物科技学院