下调NF-κB信号通路促进人羊膜间充质干细胞上皮化

作者：刘拟舟; 毛艳华; 张文文; 张应凤; 王佳; 李长江; 陈秋宏; 吴莎莎; 王婷婷; 黄玺玥; 谢乐乐; 孙聪聪^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(16): 1712-1721.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202303019

• NF-κB信号通路
• 人羊膜间充质干细胞
• 宫腔粘连
• 上皮化

目的 探讨NF-κB信号通路在诱导人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells, hAMSCs)上皮化的过程中发挥的作用。方法 分离和培养hAMSCs,将hAMSCs分为对照组和诱导组(n=3),采用RT-qPCR检测上皮化标志物(CK-7、CK-19、E-cadherin)、间质标志物(Vimentin)、NF-κB信号通路关键因子(IκBα、p65)和NF-κB信号通路靶基因cyclin D1的mRNA表达水平；采用免疫荧光检测CK-7、E-cadherin、Vimentin、IκBα、p65和p-p65的蛋白表达水平；为确认NF-κB信号通路在hAMSCs上皮化中的作用，将hAMSCs分为诱导组、抑制剂组、Ad-GFP组(空白腺病毒)、Ad-IκBα组(腺病毒过表达IκBα)、LV-GFP组(空白慢病毒)、LV-RELA-RNAi组(慢病毒沉默p65)(n=3)。RT-qPCR检测CK-7、CK-19、E-cadherin、Vimentin、IκBα和p65的mRNA表达水平，免疫荧光检测CK-7、E-cadherin、Vimentin和IκBα、p65、p-p65的蛋白表达水平。结果 与对照组比较，诱导组中CK-7、CK-19、E-cadherin的mRNA表达升高(P<0.01),CK-7、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),Vimentin的mRNA表达降低(P<0.01),蛋白表达降低(P<0.05),IκBα、p65、cyclin D1的mRNA表达降低(P<0.001),IκBα、p65、p-p65蛋白表达降低(P<0.05);抑制剂组、Ad-IκBα组、LV-RELA-RNAi组中CK-7、CK19、E-cadherin的mRNA表达较诱导组明显升高(P<0.01),CK-7、E-cadherin蛋白表达较诱导组升高(P<0.05),Vimentin的mRNA表达明显下降(P<0.01),蛋白表达降低(P<0.05)。结论 NF-κB信号通路参与hAMSCs上皮化的调控，下调NF-κB信号通路能有效促进hAMSCs上皮化。

• 单位
  重庆医科大学