摘要
目的 c-CBL基因编码的c-CBL蛋白具有重要的生物学活性,在细胞增殖分化中有重要作用。本研究转染正常c-CBL基因至伊马替尼耐药胃肠道间质瘤细胞,观察其对细胞生长作用的影响。方法选择经手术切除后口服伊马替尼>6个月(400mg/d)腹腔内复发的胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)患者作为瘤源培养细胞。通过携带正常c-CBL基因的逆转录病毒载体转染耐药GIST细胞中,用RT-PCR及蛋白质印迹法检测基因转染前后表达水平,MTT法测定转染前后生长速度。结果转染前后c-CBL蛋白相对表达量分别为0.41±0.05和1.56±0.06,转染后c-CBL蛋白表达增加了约3.8倍,t=35.623,P=0.001;转染前后c-CBL基因RT-PCR结果显示,c-CBL表达分别为4.50±1.30和6.20±1.40,转然后c-CBL基因表达增强,t=23.75,P=0.023。转染前后耐药细胞倍增时间分别为(32.75±1.21)h和(46.90±1.09)h,转染正常c-CBL基因后耐药细胞生长较转染前生长慢,细胞倍增时间延长14.15h,两者相比差异有统计学意义,t=121.4,P=0.033。结论通过转染正常c-CBL至耐药GIST细胞,转染后耐药GIST细胞的c-CBL蛋白表达水平升高,抑制了肿瘤细胞生长速度。
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单位四川省医学科学院(四川省人民医院); 四川省医学科学院(四川省人民医院); 安徽医科大学第一附属医院; 四川省医学科学院·四川省人民医院; 四川大学