尼日菌素对人上皮性卵巢癌细胞的抑制作用及其机制研究

作者：王稳; 田翔宇; 赵燕; 崔秀娟; 姚淑娟; 张师前^*

来源：肿瘤研究与临床, 2018, 30(09): 597-602+606.

• 卵巢肿瘤
• 尼日菌素
• 上皮细胞-间充质细胞转换
• 细胞迁移
• 细胞侵袭

目的探讨尼日菌素对人上皮性卵巢癌(EOC)A2780和SKOV3细胞的抑制作用,以及尼日菌素抑制细胞迁移和侵袭可能的分子机制。方法用不同浓度(0.312 5、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40、80μmol/L)尼日菌素分别作用于A2780和SKOV3细胞,二甲基亚砜(DMSO)处理细胞作为对照组,通过CCK-8法检测不同浓度的尼日菌素对EOC细胞增殖的影响。将A2780和SKOV3细胞分别分为3组:尼日菌素5、10、20μmol/L处理组,同时以DMSO处理作为对照组,通过Transwell实验分析尼日菌素对EOC细胞迁移及侵袭能力的影响。采用蛋白质印迹法检测经不同浓度尼日菌素处理后上皮细胞-间充质细胞转化(EMT)过程中上皮细胞标志物E-cadherin、间叶细胞标志物Vimentin以及相关转录因子Slug、Snail和Twist的表达,并分析Wnt-β-catenin信号通路相关蛋白Gsk-3β、p-Gsk-3β和β-catenin的表达变化情况。结果 CCK-8实验结果发现,尼日菌素对A2780细胞[半抑制浓度(IC50)(16.19±0.26)μmol/L]和SKOV3细胞[IC50(11.87±0.21)μmol/L]具有细胞毒性作用(P<0.05)。Transwell迁移实验结果显示,随着尼日菌素作用浓度(5、10、20μmol/L)的增加,穿膜的A2780和SKOV3细胞数较对照组减少[(121±9)、(92±7)、(59±5)个/高倍视野和(120.4±2.6)、(91.8±5.5)、(80.0±4.0)个/高倍视野,均P<0.05];Transwell侵袭实验显示,A2780和SKOV3细胞的侵袭能力同样随着尼日菌素作用浓度的增加而受到抑制,并呈浓度依赖性下降[(61.2±3.7)、(43.2±4.3)、(23.6±2.1)个/高倍视野和(85.2±7.0)、(65.2±4.6)、(45.6±4.4)个/高倍视野,均P <0.05]。E-cadherin的表达随着尼日菌素作用浓度(5、10、20μmol/L)的增加而升高,而Vimentin、Slug、Snail、Twist、p-Gsk3β、β-catenin的表达呈浓度依赖性减少(P<0.05)。结论尼日菌素可能通过激活Wnt-β-catenin信号通路诱导EOC细胞发生EMT,从而促进EOC细胞的迁移和侵袭。

• 单位
  山东大学齐鲁医院; 滕州市中心人民医院; 山东省临沂市人民医院