基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性成分分析

作者：王月; 刘晓谦; 梁曜华; 冯伟红; 李春; 王智民

来源：中国实验方剂学杂志, 2021, 27(20): 130-137.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211446

• 甘青乌头(榜嘎)
• 乙酰胆碱酯酶
• 超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)
• 二萜生物碱
• 关附壬素
• 二氯甲烷部位
• 正丁醇部位

目的:明确甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶的活性成分,为寻找新的抗阿尔茨海默病（AD）药物提供参考。方法:采用改良的Ellman's法筛选甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性部位,超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）对活性部位的化学成分进行分析,色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7μm）,流动相选择乙腈（A）-0.4%氨水溶液（B）梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,柱温30℃。二氯甲烷萃取部位A相比例随时间变化为0～3 min,5%A;3～7 min,5%～20%A;7～11.5 min,20%～33%A;11.5～15.5 min,33%～50%A;15.5～20.5 min,50%～80%A;20.5～23 min,80%～85%A;23～25 min,85%～95%A。正丁醇萃取部位A相比例随时间变化为0～2 min,5%A;2～8 min,5%～20%A;8～11 min,20%～33%A;11～15 min,33%～95%A。质谱条件为电喷雾离子源,正离子全扫描模式采集数据,检测范围m/z 100～1 500。结果:甘青乌头醇提物的二氯甲烷萃取部位和正丁醇萃取部位对乙酰胆碱酯酶均有一定的抑制作用,二者的半数抑制浓度分别为（64±4.4）,（85.7±3.8）mg·L-1。经UPLC-Q-TOF-MS/MS分析,从二氯甲烷萃取部位共推测出21个生物碱类成分,正丁醇萃取部位共推测出11个生物碱类成分;2个部位均含有的关附壬素为首次在甘青乌头中发现。结论:二萜生物碱是甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性的主要药效物质,值得深入挖掘。

• 单位
  广东药科大学; 中药质量控制技术国家工程实验室; 中国中医科学院中药研究所